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　　植物被视为生产有价值重组蛋白（即生物药物）的替代表达系统。瞬时基因表达（Transient Gene Expression, TGE）方法可在植物细胞感染后1–2周内获得高水平目标重组蛋白。然而，目标转基因的表达及重组蛋白的最终产量受多种因素影响：含转基因表达

　　植物被视为生产有价值重组蛋白（即生物药物）的替代表达系统。瞬时基因表达（Transient Gene Expression, TGE）方法可在植物细胞感染后1–2周内获得高水平目标重组蛋白。然而，目标转基因的表达及重组蛋白的最终产量受多种因素影响：含转基因表达盒的效率、目标重组蛋白在植物细胞内的稳定性、用于将转基因递送至植物细胞的农杆菌（Agrobacterium）菌株、产生重组蛋白的宿主植物物种及其生理状态、特定化学品的暴露以及物理环境条件。本综述总结并讨论了有关提高目标重组蛋白产量的研究进展，并列举例证说明通过瞬时基因表达获得的有价值重组蛋白。

　　随着蛋白类药物市场持续扩张，2024年全球销售额已超4400亿美元，预计2029年将达6550亿美元，对重组蛋白（Recombinant Protein, RP）的需求迅速增长。传统异源表达系统以大肠杆菌（Escherichia coli）和中国仓鼠卵巢（Chinese Hamster Ovary, CHO）细胞为主，虽成熟高效，但在糖基化模式、内毒素污染及部分复杂蛋白折叠上存在局限。植物作为替代宿主具有成本低、无人畜共患病原风险、可规模化种植等优势，但稳定核转化植株中重组蛋白积累量通常仅占总可溶性蛋白（Total Soluble Protein, TSP）的1–2%，且育种周期长达数月到数年。为解决“慢”和“低”两大瓶颈，研究人员系统综述了瞬时转基因表达（Transient Expression of Transgenes, TET）技术在植物系统中的原理、优化策略与实证案例，论文发表于《Cytology and Genetics》。

　　研究人员采用文献荟萃与自身实验结合的方式开展综述性研究。样本层面涵盖248种单子叶与双子叶植物细胞培养体系及本氏烟（Nicotiana benthamiana）等模式宿主；技术路径以农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）浸润（infiltration）为核心，辅以病毒载体（基于马铃薯X病毒 PVX、烟草花叶病毒 TMV等）系统扩散；在体外无菌培养体系中通过微克隆扩繁维持表达；优化维度跨遗传元件（密码子优化、病毒非翻译区 UTR、沉默抑制子）、亚细胞定位、融合标签、宿主生理状态及光温水肥等理化环境。

　　研究人员指出，植物系统相较原核/哺乳细胞系统在安全与成本上占优，但稳定核转化产量低，叶绿体转化可达TSP 20%，而TET可兼顾速度与产量。

　　TET基于转基因不整合基因组、不遗传给后代的瞬时表达，3–20天可获蛋白，最高达鲜重1–4 mg/g或TSP 60–80%。农杆菌递送中，AGL0、C58C1等菌株优于LBA4404；OD

　　以0.5–1.5为宜；本氏烟因rdrp1天然突变成为首选宿主。表达盒嵌入病毒元件（如TMV亚基因组启动子、PVX复制酶、p19沉默抑制子）可显著提升效率——研究人员自身以PVX全基因组骨架替换CaMV 35S启动子使干扰素产量提升80倍。密码子优化使人细胞因子SCF增20–30倍；靶向内质网/液泡/胞外空间可抗蛋白酶降解，如人生长激素定位于质外体增益千倍；SUMO、弹性蛋白样多肽（ELP）、疏水蛋白融合标签亦报告增产。共表达转录因子bZIP28或蛋白酶抑制剂提升溶解度与稳定性；PTGS（转录后基因沉默）由p19、HC-Pro等病毒抑制子阻断。环境上19–22℃利于T-DNA转移，短时37℃热激可升GUS活性，光照强度经生物量间接影响产量，乙酰丁香酮（Acetosyringone）100–600 μM正向调节呈剂量依赖。

　　表列案例涵盖GFP、人白细胞干扰素、生长激素、抗SARS-CoV-2纳米颗粒、炭疽受体诱饵CMG2-Fc等，证明TET在医药与疫苗抗原上的可行性。

　　研究人员总结：TET通过规避位置效应与长期适应响应，在1–2周内实现重组蛋白快速富集；产量并非单因素决定，而是表达盒设计（病毒元件+最小骨架）、宿主基因型（本氏烟及低生物碱栽培型）、农杆菌菌株配伍、亚细胞路由、融合稳定化、沉默抑制及光温密度协同调控的结果。在无菌体外体系中运行TET可契合cGMP规范，降低环境释放风险。未来方向包括食用植物宿主替代烟草以简化纯化、敲除β-1,2-木糖基/α-1,3-岩藻糖基转移酶以贴近人源糖型、以及将PVX移动蛋白用于培养物长期传代产蛋白。该综述为植物生物制药的工艺放大提供了因子级路线图。